見(jiàn)第3章第3節(jié)。常用的特異性單克隆抗體有:抗-CD45(白細(xì)胞)、抗-CD14(單核/巨噬細(xì)胞)、抗-CD11b(中性粒細(xì)胞)、抗-CD3(T淋巴細(xì)胞)和抗-CD19(B淋巴細(xì)胞)。...[繼續(xù)閱讀]

    原理見(jiàn)本章第2節(jié)“精液非精子細(xì)胞的收集”?？刹捎脽晒馊玖辖Y(jié)合的特異性單克隆抗體標(biāo)記白細(xì)胞表面的分化抗原,利用流式細(xì)胞儀對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。單克隆抗體染色過(guò)程如下。(1)試劑:①異硫氰酸熒光素(FITC)或藻紅蛋白(PE)結(jié)合的單克...[繼續(xù)閱讀]

    1.原理核酸帶有磷酸基,其等電點(diǎn)為pH1.5～2.0。當(dāng)pH值>2.0時(shí),核酸帶負(fù)電荷,能結(jié)合帶正電荷的堿性染料蘇木精而使胞核呈紫藍(lán)色,伊紅為酸性染料,能與細(xì)胞質(zhì)中帶正電荷的蛋白質(zhì)結(jié)合,使胞質(zhì)呈紅色。2.試劑(1)蘇木精染液的配制:實(shí)驗(yàn)室...[繼續(xù)閱讀]

    1.原理瑞氏染料是由酸性染料伊紅Y和堿性染料美藍(lán)組成的復(fù)合染料。姬姆薩染料是由天青、伊紅Y組成的染料。在一定的pH下,染料中有色離子作用于細(xì)胞,細(xì)胞根據(jù)其嗜色特性,選擇性地吸附所需染料而著色。2.試劑(1)瑞氏染液:瑞氏染...[繼續(xù)閱讀]

    1.原理同HE染色。不同的是染液中的俾士麥棕為鹽基性染料,伊紅、亮綠、橙黃等為酸性染料,能與細(xì)胞中具有相反電荷的蛋白質(zhì)結(jié)合,而染成各種不同的顏色,從而能區(qū)分各種細(xì)胞成分。2.試劑(1)EA-50的配制:將伊紅Y、俾士麥棕、亮綠SF染...[繼續(xù)閱讀]

    1.原理熒光染料吖啶橙與精子核中雙鏈DNA結(jié)合后在熒光顯微鏡下發(fā)出綠色熒光,而與單鏈DNA結(jié)合時(shí)發(fā)出紅色或黃色熒光。雙鏈DNA的精子有授精能力。2.試劑吖啶橙染色液的配制:吖啶橙0.1g加蒸餾水100ml,枸櫞酸1.91g加蒸餾水至100ml,Na2HPO4...[繼續(xù)閱讀]

    1.原理死亡的精子因精子膜通透性改變可使伊紅Y染料透過(guò)精子膜,精子膜內(nèi)帶陽(yáng)離子的物質(zhì)可與帶有陰離子的酸性伊紅Y染料相結(jié)合被染成紅色。2.試劑伊紅Y染液(見(jiàn)本節(jié)蘇木精-伊紅染色法)。3.操作方法取新鮮液化精液1滴,加伊紅Y溶液...[繼續(xù)閱讀]

    1.原理中性粒細(xì)胞中含有過(guò)氧化物酶,它可將雙氧水(H2O2)分解,產(chǎn)生新生態(tài)氧,使無(wú)色的甲苯胺被氧化成藍(lán)色的甲苯胺藍(lán),后者進(jìn)而形成棕色物使細(xì)胞著色。2.試劑①飽和NH4Cl溶液(250g/L);②5%(V/V)Na2·EDTA的pH6.0磷酸鹽緩沖液;③正甲苯胺0.025...[繼續(xù)閱讀]

    (1)采集:精液采集的最好方法是讓病人在實(shí)驗(yàn)室由本人手淫采集,采精前禁欲24h以上。如果有困難也可用取精器采集。應(yīng)告訴病人不能用乳膠和塑料制品的避孕套來(lái)采集精液,為保證精子的數(shù)量和質(zhì)量,必須用清洗干燥的細(xì)口徑試管收集...[繼續(xù)閱讀]

    (1)固定方式:常用的固定方式有物理法和化學(xué)法兩種方法,目前對(duì)生物組織和細(xì)胞固定的方法常用化學(xué)法。其機(jī)制是利用化學(xué)試劑和細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)發(fā)生交聯(lián),使蛋白成分凝固穩(wěn)定,并有保存糖類和脂肪成分,使其保持活體狀態(tài)下的形態(tài)結(jié)構(gòu)...[繼續(xù)閱讀]