重組質(zhì)粒pGEM-HERV-K gag的構(gòu)建與鑒定
摘要: 目的:構(gòu)建pGEM-HERV-K gag重組質(zhì)粒。方法:分離人外周血單核細(xì)胞,提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA,PCR擴(kuò)增目的基因后回收并純化目的基因,TA基因克隆方法構(gòu)建重組質(zhì)粒,并采用酶切和PCR進(jìn)行鑒定。結(jié)果:以PBMC的cDNA為模板,PCR擴(kuò)增獲得446 bp的HERV-K gag目的基因,克隆到pGEM-T載體構(gòu)建pGEM-HERV-K gag重組質(zhì)粒,酶切及PCR... ...
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