降落PCR技術(shù)檢測(cè)環(huán)狀RNA表達(dá)量的方法評(píng)價(jià)
摘要: 目的 通過(guò)擴(kuò)增低豐度表達(dá)的環(huán)狀RNA,與常規(guī)PCR反應(yīng)程序比較,評(píng)價(jià)降落PCR擴(kuò)增環(huán)狀RNA的定性定量結(jié)果。方法 人肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞中運(yùn)用Trizol法提取RNA,普通PCR和降落PCR程序擴(kuò)增circHDAC2片段,瓊脂糖凝膠電泳比較兩種PCR產(chǎn)物的電泳結(jié)果。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)對(duì)連續(xù)5倍稀釋的cDNA進(jìn)行降落PCR程序擴(kuò)增,比較定量準(zhǔn)確度并計(jì)算擴(kuò)增效... ...
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