敲除SOSSB1、SOSSB2和SOSSC基因穩(wěn)定HeLa細(xì)胞株的構(gòu)建

摘要： 目的構(gòu)建SOSSB1、SOSSB2和SOSSC基因敲除的穩(wěn)定HeLa細(xì)胞株。方法分別設(shè)計并合成SOSSB1、SOSSB2和SOSSC亞基的兩對靶向基因特定外顯子的A、B兩個單導(dǎo)向核酸(single guide RNA,sgRNA)及其互補鏈,與含BbsⅠ黏性末端的PX462載體連接,構(gòu)建重組質(zhì)粒。重組質(zhì)粒經(jīng)酶切和測序鑒定正確后,分別轉(zhuǎn)染至HeLa細(xì)胞,用2μg/mL的嘌呤霉素培... ... （共5頁）