Red/ET同源重組介導的基因克隆載體pBACS的構建、鑒定與應用
摘要: 目的 通過Red/ET同源重組技術構建pBACS基因克隆及測序質粒載體。方法 以質粒pBAC2015、pET28a為模板設計四對引物,PCR擴增得到四段彼此間有50 bp同源區(qū)域的基因片段,分別命名為bac-sop、bac-ori、bac-kan和bac-T7。利用Red/ET同源重組技術,將四段基因片段電轉至E.coli GB05-dir感受態(tài)中進行線線重組。經(jīng)酶切、測序驗證... ...
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