水熊蟲(chóng)損傷抑制基因Dsup的CRISPR/Cas9基因敲入系統(tǒng)構(gòu)建及其對(duì)HEK 293T細(xì)胞增殖能力的影響
摘要: 目的 構(gòu)建融合表達(dá)綠色熒光蛋白copGFP及水熊蟲(chóng)Dsup蛋白的HEK 293T細(xì)胞,研究Dsup蛋白對(duì)HEK293T細(xì)胞增殖能力的影響。方法 構(gòu)建CRISPR/Cas9基因敲入系統(tǒng),使用PCR技術(shù)擴(kuò)增Dsup、copGFP、EF1α、puro目的基因片段,并將其插入pAAVS1-SFFV中,構(gòu)建Dsup與copGFP融合表達(dá)載體pAAVS1-SFFV-Dsup-copGFP-... ...
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