去唾液酸糖蛋白受體的原核表達(dá)、純化及活性分析
摘要: 目的 表達(dá)與純化去唾液酸糖蛋白(ASGPR),為后續(xù)作為糖識別工具研究糖基化修飾的功能奠定基礎(chǔ)。方法 選擇Nde I和Xho I作為限制性內(nèi)切酶切割位點(diǎn),使用SnapGene設(shè)計(jì)的上下游引物,以cDNA為模板,通過PCR擴(kuò)增ASGPR基因。將擴(kuò)增產(chǎn)物與經(jīng)酶切的質(zhì)粒pET-30a(+)使用一步克隆試劑盒進(jìn)行重組。將重組產(chǎn)物轉(zhuǎn)化到感受態(tài)大腸桿菌DH5α中,隨后,將轉(zhuǎn)化后的細(xì)菌溶液涂... ...
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