高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定保加利亞乳桿菌胞內(nèi)Acetyl-CoA

摘要： 建立了一種快速測(cè)定保加利亞乳桿菌胞內(nèi)Acetyl-CoA含量的HPLC分析方法。以C18(Hypersil ODS2 5μm)色譜柱為固定相,以緩沖液A(0.2mol/L磷酸鈉,pH=5)和緩沖液B(800mL 0.25mol/L磷酸鈉,pH=5和200mL乙腈的混合物)為流動(dòng)相,梯度洗脫,流速為1mL/min,柱溫25℃,采用紫外檢測(cè)器(254nm)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明:該方法可以在17min內(nèi)實(shí)現(xiàn)Acetyl-CoA與其他物質(zhì)完全分離和定量,Acetyl-CoA在0.011~0.359μmol/mL范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好,回歸方程線性相關(guān)系數(shù)R2=0.9995,檢出限(以信噪比(S/N)為3計(jì))為0.28mg/L,定量限(以S/N為10計(jì))為0.32mg/L。該方法用于保加利亞乳桿菌胞內(nèi)Acetyl-CoA含量的測(cè)定,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=6)為0.75%,重現(xiàn)性良好,三個(gè)水平的加標(biāo)回收率為94.8%~103.3%,該方法適用于保加利亞乳桿菌胞內(nèi)Acetyl-CoA快速、高效分離和定量。 （共5頁(yè)）