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蛋白質(zhì)純化與分析 共有 141 個(gè)詞條內(nèi)容

一、蛋白質(zhì)及其性質(zhì)

    蛋白質(zhì)是由氨基酸組成的一類(lèi)高分子有機(jī)化合物,是人體的必需營(yíng)養(yǎng)素。蛋白質(zhì)的英文是protein,源于希臘文的proteios,是“頭等重要”意思,表明蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)中頭等重要的物質(zhì)。蛋白質(zhì)是細(xì)胞組分中含量最為豐富、功能最多的高分...[繼續(xù)閱讀]

蛋白質(zhì)純化與分析

二、蛋白質(zhì)純化的意義

    蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ),也是生物體內(nèi)的功能性大分子。隨著分子生物學(xué)、結(jié)構(gòu)生物學(xué)、基因組學(xué)等研究的不斷深入,人們意識(shí)到僅靠基因組的序列分析來(lái)闡明生命活動(dòng)的現(xiàn)象和本質(zhì)是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的,只有從蛋白質(zhì)組學(xué)的角度來(lái)研...[繼續(xù)閱讀]

蛋白質(zhì)純化與分析

三、蛋白質(zhì)純化的依據(jù)

    能從成千上萬(wàn)種蛋白質(zhì)混合物中純化出一種蛋白質(zhì)的原因,是不同的蛋白質(zhì)在物理、化學(xué)和生物學(xué)性質(zhì)方面有著極大的不同,這些性質(zhì)是由蛋白質(zhì)氨基酸的排列序列和數(shù)目不同造成的。連接在多肽主鏈上的氨基酸殘基可以是帶正電荷或...[繼續(xù)閱讀]

蛋白質(zhì)純化與分析

四、蛋白質(zhì)純化的一般程序

    按照蛋白質(zhì)分離純化的依據(jù),蛋白質(zhì)的純化方法可按照分子大小、形狀、帶電性質(zhì)及溶解度等主要因素進(jìn)行分類(lèi)。按分子大小和形態(tài)分為差速離心、超濾、分子篩及透析等方法;按溶解度分為鹽析、溶劑抽提、分配層析、逆流分配及結(jié)...[繼續(xù)閱讀]

蛋白質(zhì)純化與分析

五、蛋白質(zhì)純化方案的設(shè)計(jì)與評(píng)價(jià)

    蛋白質(zhì)純化的總目標(biāo)是設(shè)法增加蛋白質(zhì)樣品的純度或比活力,對(duì)純化的要求是以合理的效率、速度、收率和純度,將需要的蛋白質(zhì)從細(xì)胞的全部其他成分,特別是不想要的雜蛋白中分離出來(lái),同時(shí)仍保留它該有的生物學(xué)活性和化學(xué)完整性...[繼續(xù)閱讀]

蛋白質(zhì)純化與分析

第一節(jié) 概述

    蛋白質(zhì)是一種極具多相性的生物大分子,離開(kāi)其天然環(huán)境,蛋白質(zhì)分子極不穩(wěn)定,容易變性,另外,在細(xì)胞和提取液中蛋白質(zhì)的性狀也不盡相同。從正常生物基質(zhì)中提取各種蛋白質(zhì)均需要有特定的條件。如果不能滿(mǎn)足這一條件,蛋白質(zhì)將很...[繼續(xù)閱讀]

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一、緩沖液

    能抵御少量的酸、堿,或稀釋少量倍數(shù)時(shí),體系的pH基本不變的溶液稱(chēng)為緩沖溶液。緩沖溶液的緩沖對(duì)一般是由共軛酸堿對(duì)或兩性物質(zhì)組成。緩沖液可以抗衡蛋白質(zhì)溶液中pH的改變,選擇合適的緩沖液對(duì)于維持一定pH下蛋白質(zhì)的穩(wěn)定及保...[繼續(xù)閱讀]

蛋白質(zhì)純化與分析

二、溫度

    不同的蛋白質(zhì)在不同的溫度下具有不同的溶解度和活性。大多數(shù)蛋白質(zhì)在低溫(如0℃左右)下比較穩(wěn)定,故分離操作一般在0℃或更低溫度下進(jìn)行。例如,在生產(chǎn)人絨毛膜促性腺激素(HCG,一種糖蛋白)制品時(shí),一定要在低溫下進(jìn)行。當(dāng)溫度低...[繼續(xù)閱讀]

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三、溶液極性和離子強(qiáng)度

    在蛋白質(zhì)提取液中通常包含0.1~0.2mol/L的KCl或NaCl來(lái)模擬生理狀況下的離子強(qiáng)度。一般來(lái)說(shuō),離子強(qiáng)度較低的中性鹽溶液有促進(jìn)蛋白質(zhì)溶解、保護(hù)蛋白質(zhì)活性的作用,離子強(qiáng)度過(guò)高則會(huì)引起蛋白質(zhì)發(fā)生鹽析作用。但是,蛋白質(zhì)的性質(zhì)各不...[繼續(xù)閱讀]

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四、金屬離子

    溶液中的金屬離子影響所提取蛋白質(zhì)的活性和穩(wěn)定性。如果蛋白質(zhì)的活性或穩(wěn)定性需要金屬離子來(lái)維持,這時(shí)應(yīng)當(dāng)注意緩沖液對(duì)金屬離子的親和性,避免使用Tris緩沖液作為提取液。在100mmol/LTris緩沖液中加入2mmol/LMn2+則29%的金屬離子被...[繼續(xù)閱讀]

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